生物醫藥品聚合體分析系統 Aggregates Sizer測定例

詳細說明

 

定量性測定SVP區域的粒子量

■ 改變pH時γ球蛋白的粒徑分布與粒子量的變化

表示將γ球蛋白分散于純水、鄰苯二甲酸緩沖液(pH4)、磷酸緩沖液(pH7.4)中時的粒徑分布和粒子量(濃度:1 mg/mL)。

聚合粒子多分布在1μm至10μm之間,SVP區域的粒子量在純水中分散時最多,約4.4μg/mL,磷酸緩沖液時最少,約0.4μg/mL,相差10倍以上。

使用的檢測池

一次性樣品池
可測定樣品量0.4mL。

 

定量性確認聚合體隨時間的變化

■最多可連續測定15小時

連續定量測定最小間隔為1秒。因此,能夠有效分析亞可見聚合體顆粒的時間序列變化(大小和濃度) ,以及聚合之前和之后樣品狀態之間的差異。如未出現較大差異,即可確認樣品的穩定性。

POINT
1.島津的單光源系統使1秒鐘高速測定成為可能,憑借較高的測定速度,非常適合蛋白等物質聚合反應的時間序列監測。
2.使用微量樣品池,可邊攪拌生物醫藥品邊進行測定。有報告稱通過攪拌生物醫藥品的聚合反應加快,可以用于對于生物醫藥品聚合的特性評價篩查。

通過機械刺激加速聚合反應過程

■長達幾天的聚合反應過程分析能夠被大大縮短

微量樣品池的攪拌功能能夠實現對聚合體的機械刺激,可有效加速分析過程而無需額外的附件和軟件。這一功能可以用于蛋白質的聚合特性的篩查。

■加入L-精氨酸抑制聚合過程

上述實驗結果證明添加L-精氨酸可抑制牛血清白蛋白溶液(Tris緩沖液PH5)的聚合。這一實驗過程可利用微量樣品池的攪拌功能進行加速,顯著減少觀測所需時間。測定的總粒子量與攪拌時間的關系如Fig.1所示。可知由于添加L-精氨酸,形成的聚合體量減少。

使用的檢測池

微量樣品池SALD-BC75
最少液量為5mL。配備四氟乙烯樹脂漏斗,懸浮液粘在手上的可能性小,不污染檢測池表面。

■通過機械性刺激評價聚合體形成

本圖顯示在磷酸緩沖液(PH7.4)中分散并不斷攪拌的丙種球蛋白聚合的時間序列變化。攪拌時間:0,10,20,和30分鐘。丙種球蛋白的濃度為1mg/mL,攪拌30分鐘后亞可見聚合體顆粒的濃度從0.4mg/mL增加到2.2mg/mL,增加了4倍。

使用的檢測池

微量樣品池SALD-BC75
最小液量為5mL。 可通過攪拌板的上下運動對樣品進行機械刺激。


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